L’acquedotto, che parte dal bottino di S. Rocco nella Valle delle Fonti (Asciano) e arriva fino all’estremità nord delle mura urbane di Pisa, è lungo sei chilometri ed è una conduttura sopraelevata, costituita da 934 archi equidistanti e decrescenti, realizzati con muratura mista di pietrame e laterizi, che furono progettati nel XVI secolo dal Granduca Ferdinando I Dé Medici "Magnus Dux Etruriae". Nella valle delle fonti esistono una serie di bottini di raccolta delle sorgenti, che convogliano le acque al bottino principale (S.Rocco).

La sua costruzione fu affidata all’architetto Raffaello Zanobi di Pagno, che iniziò le fondazioni dei pilastri delle arcate tra il 1588 e il 1592; poiché nel 1594 questi si ammalò, la direzione del cantiere fu affidata all’ingegner Andrea Sandrini che portò a conclusione l’opera nel 1613.

Per finanziare la costruzione dell’acquedotto furono utilizzati i proventi della tassa sul sale e i ricavi della vendita dei pini, durante i lavori; l’acquedotto ebbe lo scopo di portare l’acqua sorgiva caduta sui Monti Pisani alle fontanelle cittadine per oltre tre secoli.